公共場所空氣中細菌總數檢驗方法

　　1 定義

　　撞擊法(impacting method)是采用撞擊式空氣微生物采樣器采樣，通過抽氣動力作用，使用空氣通過狹穎或小孔而產生高整氣流，使用懸浮在空氣中的帶菌粒子撞擊到營養瓊脂平板上，經37°、48h培養后，計算出每m3空氣中所含的細菌菌落數的采樣測定方法。

　　自然沉降法(natural sinking method)是指直徑9cm的營養瓊脂平板在采樣點暴露15分鐘，經37°、48h培養后計數生長的細菌菌落數的采樣測定方法。

　　2 儀器和設備

　　2.1高壓蒸汽滅菌器。

　　2.2干熱滅菌器。

　　2.3恒溫培養箱。

　　2.4冰箱。

　　2.5平皿(直徑9cm)。

　　2.6制備培養基用一般設備：量筒，三角燒瓶，pH計或精密pH試紙等。

　　2.7撞擊式空氣微生物采樣器。

　　3培養基

　　3.1營養瓊脂培養基

　　3.1.1成分;蛋白胨

　　牛肉浸膏 10g

　　氯化鈉 3g

　　瓊脂 15～20g

　　蒸餾水 1000ml

　　3.1.2制法 將上述各成分混合，加熱溶解，校正pH至7.4，過濾分裝，121℃20min高壓滅菌。用自然沉降法測定時，傾注約15ml于滅菌平皿內，制成營養瓊脂平板。撞擊法參照采樣器使用說明制備營養瓊脂平板。

　　4操作步驟

　　4.1撞擊法

　　4.1.1選擇有代表性的位置設置采樣點。將采樣器消毒，按儀器使用說明進行采樣。

　　4.1.2樣品采完后，將帶核輻射營養瓊脂平板置36±1℃恒溫箱中，培養48h，計數菌落數，并根據采樣器的流量和采樣時間，換算成每m3空氣中的菌落數，以CFU/m3報告結果。

　　4.1.3選擇撞擊式空氣微生物采樣器的基本要求。

　　(a)對空氣中細菌捕獲率達95%。

　　(b)操作簡單，攜帶方便，性能穩定，便于消毒。

　　4.2自然沉降法

　　4.2.1設置采樣點時，應根據現場的大小，選擇有代表性的位置作為空氣細菌檢測的采樣點。通常設置5個采樣點，即室內墻角對角線交點為1采樣點，該交點與四墻角連線的中點為另外4個采樣點。采樣高度為1.2～1.5m。采樣點應遠離墻壁1m以上，并避開空調、門窗等空氣流通外。

　　4.2.2將營養瓊脂平板置于采樣點處，打開皿蓋，暴露5分鐘，蓋上皿蓋，翻轉平板，置36±1℃恒溫箱中，培養48h。

　　4.2.3計數每塊平板上生長的菌落數，求出全部采樣點的平均菌落數，以CFU/皿報告結果。